Foredirect RT-qPCR किट
विवरण
ForeDirect RT-qPCR Kit RNA शुद्धिकरण प्रक्रियाहरू बिना स्वाब सङ्कलनबाट RNA प्रत्यक्ष वास्तविक समय प्रवर्धनको लागि डिजाइन गरिएको हो।यो किटले एक घण्टा भित्र qRT-PCR चक्र पूरा गर्छ।इन्जाइम मिक्स रिभर्स ट्रान्सक्रिप्टेज, हट-स्टार्ट टाक डीएनए पोलिमरेज, RNase अवरोधकको एक अनुकूलित मिश्रण हो।प्रतिक्रिया बफरले सबै आवश्यक घटकहरू समावेश गर्दछ, अनुकूलित बफर कम्पोनेन्टहरू सहित, Mg2+, dUTP, र dNTPs।
निर्दिष्टीकरणहरू
100T
किट अवयवहरू
न्यूक्लिक एसिड रिलीज एजेन्ट |
आरएनए संरक्षक |
2× RT-qPCR बफर |
इन्जाइम मिश्रण (Taq&M-MLV) |
निर्देशनहरू |
PCR आवेदन
1. PCR प्रतिक्रिया ट्यूबहरू छोटो रूपमा सेन्ट्रीफ्यूज भएपछि, तिनीहरूलाई एम्प्लीफिकेशन उपकरणको नमूना ट्यांकमा राख्नुहोस्।
2. थर्मल प्रोटोकल
चरण | तापक्रम | समय | साइकलहरू | |
1 | उल्टो ट्रान्सक्रिप्शन | ५० ℃ | १५ मिनेट | 1 |
2 | प्रि-डिनेचरेशन | 95 ℃ | १ मिनेट | 1 |
3 | विकृतीकरण | 95 ℃ | १० सेकेन्ड | 42 |
4 | अन्ननल/विस्तार | ६० ℃ | ३० सेकेन्ड |
नोट:प्रत्येक चक्रको विस्तार चरण पछि तुरुन्तै फ्लोरोसेन्ट संकेत पत्ता लगाइएको थियो।
3. सेटिङ पछि, फाइल बचत गर्नुहोस् र प्रतिक्रिया कार्यक्रम चलाउनुहोस्।
सञ्चालन चरणहरू
अभिकर्मक तयारी गर्नु अघि, किटमा भएका सबै अभिकर्मकहरूलाई कोठाको तापक्रममा पगाल्नुपर्छ र बिस्तारै मिसाउनु पर्छ।
अभिकर्मक तयारी
1. न्यूक्लिक एसिड रिलीज मिक्स तयार गर्नुहोस्
कम्पोनेन्ट | मात्रा प्रति नमूना वा नियन्त्रण |
न्यूक्लिक एसिड रिलीज एजेन्ट | 5μL |
आरएनए संरक्षक | ०.५ μL |
2. प्रतिक्रिया मिश्रण तयार गर्नुहोस्
कम्पोनेन्ट | मात्रा प्रति नमूना वा नियन्त्रण |
2× RT-qPCR बफर | १५ μL |
इन्जाइम मिश्रण (Taq&M-MLV) | 1.5 μL |
प्राइमर्स र प्रोबहरू | 1μL |
भण्डारण र शेल्फ जीवन
- किट -20 मा भण्डारण गर्नुपर्छ± 5℃।वैधता अवधि 12 महिना हो।
- दोहोरिएको फ्रिज-थाउ साइकल (<5 चक्र) लाई बेवास्ता गर्नुहोस्।