QuickEasyᴹ वास्तविक समय PCR Kit-Takman
किट विवरण:
◮अद्वितीय PCR अप्टिमाइजेसन प्रणालीले 2×QuickEasy बनाउँछTMवास्तविक PCR मिक्स-Takman अधिक उपयुक्त।
◮हट-स्टार्ट फोरेजीन एचएस टाक पोलिमरेजमा उच्च प्रवर्द्धन दक्षता, उच्च प्रवर्धन संवेदनशीलता, र उच्च प्रवर्धन विशिष्टता छ।
◮2× QuickEasyTMवास्तविक PCR मिक्स - Taqman ले अनुक्रम-विशिष्ट जाँच पत्ता लगाउने संवेदनशीलता र विशिष्टता सुधार गर्न फोरेजीन द्वारा अनुकूलित एक अद्वितीय प्रणाली प्रयोग गर्दछ, जुन जीनोटाइपिङ र प्रतिलिपि संख्या भिन्नता निर्धारण र सही परिणाम प्राप्त गर्न प्रयोग गर्न सकिन्छ।
◮यो उत्पादन ROX आन्तरिक सन्दर्भ डाईको साथ आउँछ, जुन संकेत पृष्ठभूमि र कुवाहरू बीचको सिग्नल त्रुटि हटाउन प्रयोग गर्न सकिन्छ, जुन ग्राहकहरूलाई विभिन्न प्रकारका मात्रात्मक PCR उपकरणहरूमा प्रयोग गर्नको लागि सुविधाजनक छ।
विवरणहरू
2× QuickEasyTMQuickEasy द्वारा प्रदान गरिएको वास्तविक PCR मिक्स-TakmanTMरियल टाइम पीसीआर किट-ताकमान किट एक नयाँ पुस्ताको मास्टर मिक्स प्रणाली हो जुन विशिष्ट फ्लोरोसेन्ट प्रोबहरू प्रयोग गरेर रियल टाइम पीसीआर प्रवर्द्धन प्रतिक्रियाको लागि डिजाइन गरिएको हो।यसको कोर फोरेजीन एचएस टाक डीएनए पोलिमरेज एन्टिबडी परिमार्जनमा आधारित छ, फोरेजीन थप अनुकूलित पीसीआर प्रणालीसँग संयोजनमा प्रयोग गरिन्छ, उच्च विशिष्टता र प्रवर्धन दक्षता छ।साधारण PCR मिक्सको तुलनामा, यसमा बलियो प्रवर्धन क्षमता र कम बेमेल दर छ।यो गैर-विशिष्ट प्रवर्धन कम गर्न र PCR को शुद्धता सुधार गर्न प्रतिदीप्ति मात्रात्मक PCR प्रतिक्रिया मा प्रयोग गर्न सकिन्छ।यसले उत्पादन विशिष्टता र प्रतिक्रिया संवेदनशीलतालाई धेरै सुधार गर्न सक्छ।एकै समयमा, ROX आन्तरिक सन्दर्भ डाईको रूपमा प्रदान गरिएको थियो।
QuickEasyTMरियल टाइम पीसीआर किट-ताकमान किटसँग टेम्प्लेटको मात्रामा अनुप्रयोगको फराकिलो दायरा छ, र यसले विभिन्न मात्रात्मक क्षेत्रहरूमा राम्रो मानक वक्र प्राप्त गर्न सक्छ, र राम्रो पुनरावृत्ति र उच्च आत्मविश्वासका साथ लक्ष्य जीनहरूको सही मात्रा र पत्ता लगाउन सक्छ।
निर्दिष्टीकरणहरू
200 तयारी,५०० तयारी,1000 तयारी,2000 तयारी
किट अवयवहरू
| QuickEasyTMवास्तविक समय PCR किट-Takman(२०μlप्रणाली) | ||||
| किट सामग्री | QP-01121 | QP-01122 | QP-01123 | QP-01124 |
| 200 तयारी | 500 तयारी | 1000 तयारी | 2000 तयारी | |
| २×छिटोसजिलोTM वास्तविक पीसीआर मिश्रण- ताकमान | १ एमएल×2 | १.७ एमएल×3 | १.७ एमएल×6 | १.७ एमएल×12 |
| 20×ROX सन्दर्भ डाई | २००μL | ०.५ एमएल | १ एमएल | १ एमएल×2 |
| DNase-मुक्त ddH2O | १.७ एमएल | १.७ एमएल×2 | १० एमएल | २० एमएल |
| IFU | 1टुक्रा | 1टुक्रा | 1टुक्रा | 1टुक्रा |
सुविधाहरू र फाइदाहरू
■ अद्वितीय PCR अप्टिमाइजेसन प्रणालीले 2×QuickEasy बनाउँछTMवास्तविक PCR मिक्स-Takman अधिक उपयुक्त।
■ हट-स्टार्ट फोरजीन HS Taq पोलिमरेजमा उच्च प्रवर्द्धन दक्षता, उच्च प्रवर्धन संवेदनशीलता, र उच्च प्रवर्धन विशिष्टता छ।
■ २× QuickEasyTM वास्तविक PCR मिक्स - Taqman ले अनुक्रम-विशिष्ट जाँच पत्ता लगाउने संवेदनशीलता र विशिष्टता सुधार गर्न फोरेजीन द्वारा अनुकूलित एक अद्वितीय प्रणाली प्रयोग गर्दछ, जुन जीनोटाइपिङ र प्रतिलिपि संख्या भिन्नता निर्धारण र सही परिणाम प्राप्त गर्न प्रयोग गर्न सकिन्छ।
■ यो उत्पादन ROX आन्तरिक सन्दर्भ डाईको साथ आउँछ, जुन संकेत पृष्ठभूमि र कुवाहरू बीचको सिग्नल त्रुटि हटाउन प्रयोग गर्न सकिन्छ, जुन ग्राहकहरूलाई विभिन्न प्रकारका मात्रात्मक PCR उपकरणहरूमा प्रयोग गर्नको लागि सुविधाजनक छ।
किट आवेदन
■ टेम्प्लेट मात्रात्मक विश्लेषणको लागि फ्लोरोसेन्स मात्रात्मक पीसीआर;
■ सीपरम्परागत पीसीआर प्रवर्धन;
■ एलिल पत्ता लगाउन प्रयोग गर्न सकिन्छ.
भण्डारण र शेल्फ जीवन
किट अँध्यारोमा -20 डिग्री सेल्सियसमा भण्डारण गर्नुपर्छ;यदि यो बारम्बार प्रयोग गरिन्छ भने, यसलाई छोटो अवधिको लागि 4 डिग्री सेल्सियसमा पनि भण्डारण गर्न सकिन्छ (10 दिन भित्र प्रयोग गर्नुहोस्)।
वास्तविक समय पीसीआर प्राइमर डिजाइन सिद्धान्तहरू
फर्वार्ड प्राइमर र रिभर्स प्राइमर
वास्तविक समय पीसीआर को लागी, प्राइमर डिजाइन धेरै महत्त्वपूर्ण छ।प्राइमरहरू PCR प्रवर्धनको विशिष्टता र दक्षतासँग सम्बन्धित छन्, र निम्न सिद्धान्तहरूको सन्दर्भमा डिजाइन गर्न सकिन्छ:
प्राइमर लम्बाइ: 18-30bp।
GC सामग्री: 40-60%।
Tm मान: प्राइमर डिजाइन सफ्टवेयर, जस्तै प्राइमर 5, प्राइमर को Tm मान दिन सक्छ।अपस्ट्रिम र डाउनस्ट्रीम प्राइमरहरूको Tm मानहरू सकेसम्म नजिक हुनुपर्छ।Tm गणना सूत्र पनि प्रयोग गर्न सकिन्छ: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T)।PCR प्रदर्शन गर्दा, 5 °C को प्राइमर Tm मान भन्दा कम तापमान सामान्यतया annealing तापमान को रूप मा चयन गरिन्छ (annealing तापमान मा समान वृद्धि PCR प्रतिक्रिया को विशिष्टता बढाउन सक्छ)।
प्राइमर र पीसीआर उत्पादनहरू:
डिजाइन प्राइमर PCR प्रवर्धन उत्पादन लम्बाइ प्राथमिकता 100-150bp छ।
टेम्प्लेटको माध्यमिक संरचनात्मक क्षेत्रमा डिजाइन प्राइमरहरू सम्भव भएसम्म बेवास्ता गर्नुपर्छ।
अपस्ट्रिम र डाउनस्ट्रीम प्राइमरहरूको 3′ छेउहरू बीच 2 वा बढी पूरक आधारहरूको गठनबाट बच्नुहोस्।
प्राइमर 3′ टर्मिनल आधार 3 अतिरिक्त लगातार G वा C संग उपस्थित हुन सक्दैन।
प्राइमरहरू आफैंमा पूरक संरचनाहरू हुन सक्दैनन्, अन्यथा हेयरपिन संरचना बनाइनेछ, जसले PCR प्रवर्धनलाई असर गर्छ।
ATCG लाई प्राइमर अनुक्रममा सकेसम्म समान रूपमा वितरण गरिनुपर्छ, र 3′ टर्मिनल आधारलाई T को रूपमा बेवास्ता गर्नुपर्छ।
परिशिष्ट १: सेल डाइरेक्ट RT-qPCR किट कम्पोनेन्ट सप्लिमेन्ट प्याक
1.सेल लाइसिस समाधान
|
| |||
| किट अवयवहरू (24-वेल लिसिस प्रणाली / राम्रो) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
| १०० टि | ५०० टि | ||
| भागम | बफर CL | 20 मिलीलीटर | 100 मिलीलीटर |
| फोरजीन प्रोटीज प्लस II | 400 μl | १ मिली × २ | |
| बफर ST | १ मिली × २ | १० एमएल | |
| भागII | डीएनए इरेजर | 400 μl | १ मिली × २ |
2.RT मिक्स
|
| |
| किट अवयवहरू (20 μl प्रतिक्रिया प्रणाली) | DRT-01011-B1 |
| २०० टि | |
| 5× प्रत्यक्ष RT मिक्स | 800 μl |
| RNase-मुक्त ddH2O | १.७ मिली × २ |
|
| ||
| किट अवयवहरू (20 μl प्रतिक्रिया प्रणाली) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
| २०० टि | १००० टि | |
| 2× प्रत्यक्ष qPCR मिक्स-SYBR | १ मिली × २ | १.७ मिली × ६ |
| 50× ROX सन्दर्भ डाई | 40 μl | 200 μl |
| RNase-मुक्त ddH2O | १.७ एमएल | १० एमएल |
