Lnc-RT Heroᵀᴹ I (gDNase सँग) (lncRNA बाट पहिलो-स्ट्र्यान्ड cDNA संश्लेषणको लागि सुपर प्रिमिक्स)
निर्दिष्टीकरणहरू
25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I (gDNase सँग) एक रिभर्स ट्रान्सक्रिप्शन प्रणाली हो जुन विशेष रूपमा lncRNA को लागि जीनोमिक DNA संदूषण हटाउनको लागि विकसित गरिएको हो।5×gDNase मिक्सले qPCR नतिजाहरूमा जीनोमको हस्तक्षेपलाई प्रभावकारी रूपमा बेवास्ता गरी 2 मिनेटको लागि 42°C मा RNA मा रहेको बाँकी जीनोमलाई द्रुत रूपमा हटाउन सक्छ।
5×L-RT HeroTM Mix मा Foregene LncRNA रिभर्स ट्रान्सक्रिप्टेज विशेष फोरेजीन द्वारा विकसित गरिएको छ, जुन विशेष गरी lncRNA र अन्य लामो RNA जटिल टेम्प्लेटहरूको लागि नयाँ प्रकारको रिभर्स ट्रान्सक्रिप्टेज हो, बलियो RNA आत्मीयता र उच्च रिभर्सल रेकर्डिङ दक्षताको साथ।अप्टिमाइज गरिएको प्रणालीले रिभर्स ट्रान्सक्रिप्सन दरलाई छिटो बनाउँछ र उच्च GC सामग्री र जटिल माध्यमिक संरचनाको साथ RNA टेम्प्लेटहरू सजिलै ट्रान्सक्राइब गर्न सक्छ।पहिलो स्ट्र्यान्ड cDNA संश्लेषण 15 मिनेटमा 42 डिग्री सेल्सियसमा पूरा गर्न सकिन्छ।
किट अवयवहरू
| 5× gDNase मिक्स |
| 5× L-RT HeroTM मिक्स |
| RNase-मुक्त ddH2O |
| निर्देशनहरू |
सुविधाहरू र फाइदाहरू
■gDNA हटाउन कुशल क्षमता, जसले 2 मिनेट भित्र टेम्प्लेटमा gDNA हटाउन सक्छ।
■ यसले कुशलतापूर्वक lncRNA को ट्रान्सक्रिप्शनलाई उल्टाउन सक्छ।जब रिभर्स ट्रान्सक्रिप्सन उत्पादन qPCR को अधीनमा हुन्छ, Ct मान परम्परागत रिभर्स ट्रान्सक्रिप्सन प्रणालीको भन्दा कम हुन्छ।
■ कुशल रिभर्स ट्रान्सक्रिप्शन प्रणाली, यसले पहिलो स्ट्र्यान्ड cDNA को संश्लेषण पूरा गर्न 15 मिनेट मात्र लिन्छ।
■ जटिल टेम्प्लेटहरू: उच्च GC सामग्री र जटिल माध्यमिक संरचना भएका टेम्प्लेटहरूलाई पनि उच्च दक्षताका साथ उल्टाउन सकिन्छ।
■ उच्च-संवेदनशीलता रिभर्स ट्रान्सक्रिप्शन प्रणाली, pg-स्तर टेम्प्लेटहरूले पनि उच्च-गुणस्तरको cDNA प्राप्त गर्न सक्छन्।
■ रिभर्स ट्रान्सक्रिप्शन प्रणाली उच्च थर्मल स्थिरता छ, इष्टतम प्रतिक्रिया तापमान 42 छ℃, र यो अझै पनि 50 मा राम्रो रिभर्स ट्रान्सक्रिप्शन प्रदर्शन छ℃.
किट आवेदन
lncRNA सापेक्ष मात्रात्मक विश्लेषण।
lncRNA निरपेक्ष मात्रात्मक विश्लेषण।
यसले आरएनए भाइरस जस्ता ट्रेस आरएनएलाई छिटो र सही रूपमा विश्लेषण गर्न सक्छ।
उच्च GC सामग्री वा जटिल माध्यमिक संरचना भएको RNA टेम्प्लेटहरूको उल्टो ट्रान्सक्रिप्शन।
कार्य प्रवाह
भण्डारण र शेल्फ जीवन
किट -20 मा भण्डारण गर्नुपर्छ°C. उत्पादनलाई -२० मा स्थिर तापक्रमको फ्रिजमा भण्डार गर्नुहोस्°सी प्राप्ति पछि तुरुन्तै।यदि भण्डारण अवस्थाहरू उपयुक्त छन् भने, उत्पादनले 1-वर्षको वैधता अवधिमा कुनै पनि कार्यसम्पादनलाई घटाउने छैन।
समस्या विश्लेषण गाइड
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-विशिष्ट प्रवर्धन
1. अनुचित प्राइमर डिजाइन
सिफारिस: प्राइमर डिजाइन सिद्धान्त अनुसार प्राइमर डिजाइन गर्नुहोस्।
2. जीनोम अवशेषहरू।
सुझाव: सुनिश्चित गर्नुहोस् कि gDNA हटाउने प्रतिक्रियाको पहिलो चरण तापमान 42°C हो, र प्रतिक्रिया समय पनि 5 मिनेटमा विस्तार गर्न सकिन्छ।
RT-qPCR द्वारा कुनै प्रवर्धन संकेत छैन
1. आरएनए घटाइएको छ।
सिफारिस: आरएनए निकासीका लागि सामग्री सकेसम्म ताजा हुनुपर्छ, र उच्च गुणस्तर र उच्च शुद्धता आरएनए प्रयोग गर्नुपर्छ।
2. RNA मा अवरोधकहरू हुन्छन्।
सिफारिस: उल्टो ट्रान्सक्रिप्शन अवरोधकहरूले सामान्यतया SDS, guanidine साल्ट, EDTA, आदि समावेश गर्दछ। अवरोधकहरू हटाउन RNA precipitate 70% इथेनोलले धुन सिफारिस गरिन्छ।
3. प्राइमर डिजाइन मुद्दाहरू।
सिफारिस: प्राइमर डिजाइन सिद्धान्त अनुसार, निरीक्षणको लागि प्राइमरहरू पुन: डिजाइन गर्नुहोस्।
लक्ष्य ब्यान्ड खाली नियन्त्रणमा देखिन्छ
1. सञ्चालन उपकरण वा अभिकर्मक को प्रदूषण।
सिफारिस: प्रयोगका लागि सबै अभिकर्मक वा उपकरणहरू अटोक्लेभ हुनुपर्छ।DNA नमूनाहरू पिपेटमा चुस्न वा सेन्ट्रीफ्यूज ट्यूबबाट बाहिर निस्कनबाट जोगाउन ह्यान्डल गर्दा सावधान र नम्र हुनुहोस्।
2. PCR प्रतिक्रिया प्रणालीको तयारीको क्रममा प्रदूषण भयो।
सिफारिस: ह्यान्डल गर्दा आवश्यक सावधानीहरू लिनुहोस्, जस्तै: लेटेक्स पन्जा लगाउने, फिल्टर टिपहरू प्रयोग गर्ने।रियल टाइम पीसीआर मिक्सलाई प्रदुषण-प्रूफ प्रणालीमा प्रयोग गर्नुहोस्।
3. प्राइमरहरू बिग्रेका छन्।
सुझाव: SDS-PAGE इलेक्ट्रोफोरेसिस प्रयोग गर्नुहोस् कि प्राइमरहरू बिग्रेको छ कि छैन पत्ता लगाउन, र फ्लोरोसेन्स पत्ता लगाउने प्रयोगहरूको लागि नयाँ प्राइमरहरूसँग प्रतिस्थापन गर्नुहोस्।
निर्देशन पुस्तिका:
