FAQ को लागिपशु कुल आरएनए अलगाव किट
तपाईंले सामना गर्न सक्ने समस्याहरूको निम्न विश्लेषणपशु ऊतक / सेल आरएनए निकासी will help you with your experiments. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali : Tech@foregene.com.
आरएनए निकालिएको छैन वा आरएनए उपज कम छ
त्यहाँ प्रायः विभिन्न कारकहरू छन् जसले रिकभरी दक्षतालाई असर गर्छ, जस्तै: टिश्यू नमूना आरएनए सामग्री, सञ्चालनको विधि, इलुसन भोल्युम, आदि।
1. आइस बाथ वा क्रायोजेनिक (4 डिग्री सेल्सियस) सेन्ट्रीफ्युगेशन सञ्चालनको क्रममा गरिएको थियो।
सिफारिस: सम्पूर्ण प्रक्रियामा कोठाको तापक्रम (१५-२५ डिग्री सेल्सियस) मा काम गर्नुहोस्, कम तापक्रममा आइस बाथ र सेन्ट्रीफ्यूज नगर्नुहोस्।
2. अनुचित नमूना संरक्षण वा अत्यधिक नमूना भण्डारण समय।
सिफारिस: नमूनाहरू -80 डिग्री सेल्सियसमा भण्डार गर्नुहोस् वा तरल नाइट्रोजनमा फ्रिज गर्नुहोस् र दोहोर्याइएको फ्रिज-थउ प्रयोगबाट बच्नुहोस्;आरएनए निकासीका लागि ताजा टिस्यु वा कल्चर गरिएको सेलहरू प्रयोग गर्ने प्रयास गर्नुहोस्।
3. अपर्याप्त नमूना lysis।
सिफारिस: टिस्युलाई एकरूपता गर्दा, टिस्यु पर्याप्त रूपमा एकरूप भएको र आरएनएको रिलिजको व्याख्या गर्न टिस्यु कोषहरू पर्याप्त रूपमा विभाजित भएको सुनिश्चित गर्नुहोस्।
4. eluent सही रूपमा थपिएको छैन।
सिफारिस: RNase-मुक्त ddH पुष्टि गर्नुहोस्2ओ शुद्धीकरण स्तम्भ झिल्लीको बीचमा ड्रपवाइज थपिएको छ।
5. निरपेक्ष इथेनॉलको सही मात्रा बफर RL2 वा बफर RW2 मा थपिएको थिएन।
सिफारिस: निर्देशनहरू पालना गर्नुहोस्, Buffer RL2 र Buffer RW2 मा निरपेक्ष इथानोलको सही भोल्युम थप्नुहोस् र किट प्रयोग गर्नु अघि राम्ररी मिलाउनुहोस्।
6. टिस्यु नमूना खुराक उपयुक्त छैन।
सिफारिस: 10-20 मिलीग्राम टिस्यु वा (1-5) × 10 प्रयोग गर्नुहोस्6कोशिकाहरू प्रति 500 μl बफर RL1, अत्यधिक ऊतक प्रयोगले आरएनए निकासी कम गर्न सक्छ।
7. अनुचित इल्युसन भोल्युम वा अपूर्ण उत्सर्जन।
सिफारिस: शुद्धिकरण स्तम्भको इल्युसन भोल्युम 50-200 μl छ;यदि इल्युसन प्रभाव सन्तोषजनक छैन भने, प्रिहेटेड RNase-फ्री ddH थपेपछि कोठाको तापमान प्लेसमेन्ट समय बढाउन सिफारिस गरिन्छ।2ओ, जस्तै ५-१० मिनेटको लागि।
8. शुद्धीकरण स्तम्भमा बफर RW2 धुने पछि इथेनॉल अवशेष हुन्छ।
सिफारिस: यदि बफर RW2 धुने पछि इथेनोल अवशेष छ भने, 1 मिनेटको लागि खाली ट्यूब सेन्ट्रीफ्यूगेसन, खाली ट्यूब सेन्ट्रीफ्युगेसन सञ्चालनको लागि समय 2 मिनेटमा बढाउन सकिन्छ, वा शुद्धीकरण स्तम्भलाई कोठाको तापक्रममा 5 मिनेटको लागि राख्न सकिन्छ।
शुद्ध आरएनए बिग्रेको छ
शुद्ध RNA को गुणस्तर नमूनाको संरक्षण, RNase प्रदूषण, र हेरफेर, आदि जस्ता कारकहरूसँग सम्बन्धित छ।
1. टिस्यु नमूनाहरू समयमा राखिएको छैन।
सिफारिस: यदि टिस्यु नमूनाहरू वा कोशिकाहरू सङ्कलन पछि समयमै प्रयोग गरिएन भने, तुरुन्तै -80 डिग्री सेल्सियस वा तरल नाइट्रोजनमा क्रायोप्रिजर्व गर्नुहोस्।आरएनए निकाल्नको लागि, सम्भव भएसम्म भर्खरै लिइएको टिस्यु वा सेल नमूना प्रयोग गर्नुहोस्।
2. टिस्यु नमूनाहरूको दोहोर्याइएको फ्रिज-पघलाउने।
सिफारिस: टिस्यु नमूनाहरू भण्डारण गर्दा, तिनीहरूलाई संरक्षणको लागि सानो टुक्रामा काट्नु राम्रो हुन्छ, र नमूनाको बारम्बार फ्रिज-पघ्नबाट जोगिन र आरएनएको ह्रासबाट बच्न प्रयोग गर्दा एउटा टुक्रा हटाउनु राम्रो हुन्छ।
3. RNase लाई अपरेशनको समयमा डिस्पोजेबल ग्लोभ्स, मास्क, इत्यादि नलगाइयो वा नगरेको।
सिफारिस: आरएनए निकासी प्रयोगहरू छुट्टै आरएनए हेरफेर कोठाहरूमा उत्कृष्ट प्रदर्शन गरिन्छ र प्रयोग अघि तालिका खाली गरिन्छ।
प्रयोगको क्रममा डिस्पोजेबल ग्लोभ्स र मास्क लगाउनुहोस् RNase को परिचयको कारणले हुने RNA गिरावटलाई कम गर्न।
4. अभिकर्मकहरू प्रयोगको क्रममा RNase सँग दूषित हुन्छन्।
सिफारिस: सम्बन्धित प्रयोगहरूको लागि नयाँ एनिमल टोटल आरएनए आइसोलेशन किटसँग बदल्नुहोस्।
5. आरएनए हेरफेरमा प्रयोग हुने सेन्ट्रीफ्यूज ट्यूबहरू, टिपहरू, आदि RNase बाट दूषित छन्।
सिफारिस: आरएनए निकासीमा प्रयोग गरिएका सेन्ट्रीफ्यूज ट्यूबहरू, टिपहरू, पिपेटहरू, आदि सबै RNase-मुक्त छन् भनी पुष्टि गर्नुहोस्।
शुद्ध प्राप्त आरएनएले डाउनस्ट्रीम प्रयोगहरूलाई असर गर्छ
शुद्धीकरण स्तम्भ द्वारा शुद्ध गरिएको आरएनए, यदि नुन आयनहरू, प्रोटीन सामग्री धेरै ठूलो छ भने डाउनस्ट्रीम प्रयोगलाई असर गर्नेछ, जस्तै: रिभर्स ट्रान्सक्रिप्शन, उत्तरी ब्लट एट अल।
1. उत्सर्जित आरएनएमा नुन आयन अवशेषहरू हुन्छन्।
सिफारिस: बफर RW2 मा इथानोलको सही मात्रा थपिएको छ भनी पुष्टि गर्नुहोस् र सञ्चालनको लागि संकेत गरिएको केन्द्रापसारक गतिमा २ शुद्धिकरण स्तम्भ धुने कार्य गर्नुहोस्;यदि त्यहाँ कुनै नुन आयन अवशेष छ भने, शुद्धिकरण स्तम्भलाई बफर RW2 मा 5 मिनेटको लागि कोठाको तापक्रममा छोड्नुहोस् र नुन प्रदूषणलाई अधिकतम हटाउन केन्द्रापसारन गर्नुहोस्।
2. उत्सर्जन गरिएको आरएनएमा इथानोल अवशेष।
सिफारिस: पुष्टि गर्नुहोस् कि बफर RW2 धुने पछि, खाली ट्यूब सेन्ट्रीफ्यूगेसन अपरेशन अपरेशनको लागि संकेत गरिएको सेन्ट्रीफ्यूगेशन गतिमा गर्नुहोस्, खाली ट्यूब सेन्ट्रीफ्यूगेसन अपरेशनको समय 2 मिनेटमा बढाउनुहोस् यदि त्यहाँ इथानोल अवशेष छ भने, वा यसलाई कोठाको तापक्रममा 5 मिनेटको लागि छोड्नुहोस्। आइड्यू।
नल्सेइक एसिड नमूना प्रकार को अलगाव
फोरजीनको आरएनए आइसोलेशन किटहरूले निम्न नमूना सोसहरूबाट कुल आरएनए अलगाव/निकासी प्राप्त गर्न सक्छन्: जनावरको तन्तु, बिरुवा, कोशिकाहरू, भाइरल, रगत, आदि।
म कसरी किट भण्डारण गर्छु
24 महिनाको लागि कोठाको तापमान भण्डारण।
पोस्ट समय: मार्च-०१-२०२२
