एन्टिबडीहरू, जसलाई इम्युनोग्लोबुलिन (आईजी) पनि भनिन्छ, ग्लाइकोप्रोटिनहरू हुन् जसले विशेष रूपमा एन्टिजेनहरूसँग बाँध्छन्।
 
परम्परागत एन्टिबडी तयारी जनावरहरूलाई खोप लगाएर र एन्टिसेरम सङ्कलन गरेर उत्पादन गरिन्छ।तसर्थ, एन्टिसेरममा सामान्यतया अन्य असंबंधित एन्टिजेनहरू र सीरममा अन्य प्रोटीन कम्पोनेन्टहरू विरुद्ध एन्टिबडीहरू हुन्छन्।सामान्य एन्टिजेन अणुहरूमा प्रायः धेरै फरक एपिटोपहरू हुन्छन्, त्यसैले परम्परागत एन्टिबडीहरू पनि धेरै फरक एपिटोपहरू विरुद्ध एन्टिबडीहरूको मिश्रण हुन्।एउटै एपिटोप विरुद्ध निर्देशित पारम्परिक सीरम एन्टिबडीहरू अझै पनि विभिन्न बी सेल क्लोनहरू द्वारा उत्पादित विषम एन्टिबडीहरू मिलेर बनेका छन्।त्यसकारण, परम्परागत सीरम एन्टिबडीहरूलाई पोलीक्लोनल एन्टिबडीहरू, वा छोटकरीमा पोलिक्लोनल एन्टिबडीहरू पनि भनिन्छ।
 
मोनोक्लोनल एन्टिबडी (मोनोक्लोनल एन्टिबडी) एकल बी सेल क्लोन द्वारा उत्पादित अत्यधिक एकसमान एन्टिबडी हो र केवल एक विशिष्ट एपिटोप विरुद्ध निर्देशित हुन्छ।यो सामान्यतया हाइब्रिडोमा टेक्नोलोजीद्वारा तयार गरिन्छ - हाइब्रिडोमा एन्टिबडी टेक्नोलोजी सेल फ्युजन टेक्नोलोजीमा आधारित छ, बी कोशिकाहरूलाई विशिष्ट एन्टिबडीहरू र माइलोमा कोशिकाहरूलाई बी-सेल हाइब्रिडोमामा असीम वृद्धि क्षमताको साथ स्राव गर्ने क्षमताको साथ संयोजन गर्दछ।यो हाइब्रिडोमा सेलमा अभिभावक कोशिकाको विशेषताहरू छन्।यो माइलोमा कोशिकाहरू जस्तै भिट्रोमा अनिश्चित र अमर रूपमा फैलिन सक्छ, र यसले स्पेनिक लिम्फोसाइटहरू जस्तै विशिष्ट एन्टिबडीहरू संश्लेषण र स्राव गर्न सक्छ।क्लोनिङको माध्यमबाट, एकल हाइब्रिडोमा सेलबाट व्युत्पन्न एक मोनोक्लोनल लाइन, अर्थात्, हाइब्रिडोमा सेल लाइन, प्राप्त गर्न सकिन्छ।यसले उत्पादन गर्ने एन्टिबडीहरू एउटै एन्टिजेनिक निर्धारक, मोनोक्लोनल एन्टिबडीहरू विरुद्ध अत्यधिक समरूप एन्टिबडीहरू हुन्।
 
एन्टिबडीहरू एक वा बढी Y आकारका मोनोमरहरू (अर्थात्, मोनोक्लोनल एन्टिबडीहरू वा पोलिक्लोनल एन्टिबडीहरू) को रूपमा अवस्थित छन्।प्रत्येक Y-आकारको मोनोमर 4 पोलिपेप्टाइड चेनहरू मिलेर बनेको हुन्छ, जसमा दुई समान भारी चेनहरू र दुईवटा समान प्रकाश चेनहरू समावेश हुन्छन्।लाइट चेन र भारी चेनलाई तिनीहरूको आणविक वजन अनुसार नाम दिइएको छ।Y-आकारको संरचनाको शीर्ष चर क्षेत्र हो, जुन एन्टिजेन बाध्यकारी साइट हो।(डेटाई बायो-मोनोक्लोनल एन्टिबडी अवधारणाको अंश)
 
एन्टिबडी संरचना
भारी चेन
त्यहाँ पाँच प्रकारका स्तनधारी Ig भारी चेनहरू छन्, जसलाई ग्रीक अक्षरहरू α, δ, ε, γ, र μ नाम दिइएको छ।सम्बन्धित एन्टिबडीहरूलाई IgA, IgD, IgE, IgG, र IgM भनिन्छ।विभिन्न भारी चेनहरू आकार र संरचनामा भिन्न हुन्छन्।α र γ मा लगभग 450 एमिनो एसिडहरू छन्, जबकि μ र ε मा लगभग 550 एमिनो एसिडहरू छन्।
प्रत्येक भारी चेनमा दुई क्षेत्रहरू हुन्छन्: स्थिर क्षेत्र र चर क्षेत्र।एउटै प्रकारका सबै एन्टिबडीहरू समान स्थिर क्षेत्र हुन्छन्, तर विभिन्न प्रकारका एन्टिबडीहरू बीच भिन्नताहरू छन्।भारी चेनहरू γ, α, र δ को स्थिर क्षेत्रहरू टेन्डममा तीन Ig डोमेनहरू मिलेर बनेका छन्, यसको लचिलोपन बढाउनको लागि एक कब्जा क्षेत्रको साथ;भारी चेन μ र ε को स्थिर क्षेत्रहरू 4 Ig डोमेनहरू मिलेर बनेका छन्।विभिन्न B कोशिकाहरूद्वारा उत्पादित एन्टिबडीको भारी श्रृंखलाको चर क्षेत्र फरक हुन्छ, तर एउटै B कोशिका वा सेल क्लोनद्वारा उत्पादित एन्टिबडीको चर क्षेत्र एउटै हुन्छ, र प्रत्येक भारी श्रृंखलाको चर क्षेत्र लम्बाइमा लगभग 110 एमिनो एसिड हुन्छ।, र एकल Ig डोमेन बनाउनुहोस्।
 
हल्का चेन
स्तनधारी प्राणीहरूमा केवल दुई प्रकारका प्रकाश चेनहरू छन्: लाम्ब्डा प्रकार र कापा प्रकार।प्रत्येक लाइट चेनमा दुई जोडिएका डोमेनहरू छन्: एक स्थिर क्षेत्र र एक चल क्षेत्र।प्रकाश श्रृंखला को लम्बाइ लगभग 211 ~ 217 एमिनो एसिड छ।प्रत्येक एन्टिबडीमा निहित दुई लाइट चेनहरू सधैं समान हुन्छन्।स्तनधारी प्राणीहरूका लागि, प्रत्येक एन्टिबडीमा रहेको लाइट चेनमा एउटा मात्र प्रकार हुन्छ: कापा वा लाम्ब्डा।केही तल्लो कशेरुकाहरूमा, जस्तै कार्टिलागिनस माछा (कार्टिलेज माछा) र हड्डी माछा, अन्य प्रकारका हल्का चेनहरू जस्तै iota (iota) प्रकार पनि पाइन्छ।
 
Fab र Fc खण्डहरू
एफसी खण्डलाई एन्टिबडीहरू लेबल गर्न इन्जाइमहरू वा फ्लोरोसेन्ट रंगहरूसँग प्रत्यक्ष रूपमा जोड्न सकिन्छ।यो त्यो भाग हो जहाँ एन्टिबडी एलिसा प्रक्रियाको क्रममा प्लेटमा रिभेट हुन्छ, र यो त्यो भाग हो जहाँ दोस्रो एन्टिबडीलाई इम्युनोप्रेसिपिटेशन, इम्युनोब्लोटिंग र इम्युनोहिस्टोकेमिस्ट्रीमा पहिचान गरी बाँधिएको हुन्छ।एन्टिबडीहरूलाई दुई F(ab) खण्डहरूमा र एउटा Fc खण्डमा प्रोटियोलाइटिक इन्जाइमहरू जस्तै papain द्वारा हाइड्रोलाइज गर्न सकिन्छ, वा तिनीहरूलाई पेप्सिनद्वारा काज क्षेत्रबाट तोडेर एउटा F(ab)2 खण्ड र एउटा Fc खण्डमा हाइड्रोलाइज गर्न सकिन्छ।IgG एन्टिबडी टुक्राहरू कहिलेकाहीं धेरै उपयोगी छन्।Fc खण्डको कमीको कारणले, F(ab) खण्ड एन्टिजेनसँग प्रक्षेपित हुनेछैन, न त यो भिभो अध्ययनहरूमा प्रतिरक्षा कोशिकाहरूले कब्जा गर्नेछ।साना आणविक टुक्राहरू र क्रस-लिङ्किङ प्रकार्यको अभाव (Fc खण्डको कमीको कारण) को कारणले, Fab खण्ड सामान्यतया कार्यात्मक अध्ययनहरूमा रेडियोलेबलिङको लागि प्रयोग गरिन्छ, र Fc खण्ड मुख्यतया हिस्टोकेमिकल स्टेनिङमा अवरोध गर्ने एजेन्टको रूपमा प्रयोग गरिन्छ।
 
चर र स्थिर क्षेत्रहरू
चर क्षेत्र (V क्षेत्र) N-टर्मिनसको नजिक H चेनको 1/5 वा 1/4 (लगभग 118 एमिनो एसिड अवशेषहरू समावेश गर्दछ) र L श्रृंखलाको N-टर्मिनस नजिक 1/2 (लगभग 108-111 एमिनो एसिड अवशेषहरू समावेश गर्दछ) मा अवस्थित छ।प्रत्येक V क्षेत्रमा इन्ट्रा-चेन डाइसल्फाइड बन्डहरूद्वारा बनेको पेप्टाइड रिंग हुन्छ, र प्रत्येक पेप्टाइड रिंगमा लगभग 67 देखि 75 एमिनो एसिड अवशेषहरू हुन्छन्।V क्षेत्रमा एमिनो एसिडको संरचना र व्यवस्थाले एन्टिबडीको एन्टिजेन बाध्यकारी विशिष्टता निर्धारण गर्दछ।V क्षेत्रमा एमिनो एसिडहरूको निरन्तर परिवर्तन हुने प्रकार र अनुक्रमका कारण, विभिन्न बाध्यकारी एन्टिजेन विशिष्टताहरूसँग धेरै प्रकारका एन्टिबडीहरू गठन गर्न सकिन्छ।L चेन र H चेनको V क्षेत्रहरूलाई क्रमशः VL र VH भनिन्छ।VL र VH मा, एमिनो एसिड संरचना र केहि स्थानीय क्षेत्रहरूको अनुक्रम उच्च डिग्री भिन्नता छ।यी क्षेत्रहरूलाई हाइपरभेरिएबल क्षेत्रहरू (HVR) भनिन्छ।V क्षेत्रमा गैर-HVR भागहरूको एमिनो एसिड संरचना र व्यवस्था अपेक्षाकृत रूढ़िवादी हो, जसलाई फ्रेमवर्क क्षेत्र भनिन्छ।VL मा तीन हाइपरभेरिएबल क्षेत्रहरू छन्, सामान्यतया क्रमशः 24 देखि 34 र 89 देखि 97 सम्म एमिनो एसिड अवशेषहरूमा अवस्थित छन्।VL र VH को तीन HVR लाई क्रमशः HVR1, HVR2 र HVR3 भनिन्छ।एक्स-रे क्रिस्टल विवर्तनको अनुसन्धान र विश्लेषणले प्रमाणित गर्‍यो कि हाइपरभेरिएबल क्षेत्र वास्तवमा एन्टिबडी एन्टिजन बाँधिएको ठाउँ हो, त्यसैले यसलाई पूरकता-निर्धारण क्षेत्र (सीडीआर) भनिन्छ।VL र VH को HVR1, HVR2 र HVR3 लाई क्रमशः CDR1, CDR2 र CDR3 भन्न सकिन्छ।सामान्यतया, CDR3 मा हाइपरवेरिबिलिटीको उच्च डिग्री हुन्छ।हाइपरभेरिएबल क्षेत्र पनि मुख्य स्थान हो जहाँ Ig अणुहरूको idiotypic निर्धारकहरू अवस्थित छन्।धेरैजसो अवस्थामा, एच चेनले एन्टिजेनलाई बाँध्न महत्त्वपूर्ण भूमिका खेल्छ।
स्थिर क्षेत्र (C क्षेत्र)3/4 वा 4/5 मा (लगभग एमिनो एसिड 119 देखि C टर्मिनल सम्म) C टर्मिनस नजिकैको H चेन र 1/2 (लगभग 105 एमिनो एसिड अवशेषहरू समावेश गर्दछ) L श्रृंखलाको C टर्मिनस नजिकै अवस्थित छ।एच चेनको प्रत्येक कार्यात्मक क्षेत्रले लगभग 110 एमिनो एसिड अवशेषहरू समावेश गर्दछ, र डाइसल्फाइड बन्डहरूद्वारा जोडिएको 50-60 एमिनो एसिड अवशेषहरू मिलेर बनेको पेप्टाइड रिंग समावेश गर्दछ।यस क्षेत्रको एमिनो एसिड संरचना र व्यवस्था समान जनावर Ig आइसोटाइप एल चेन र एउटै प्रकारको एच चेनमा अपेक्षाकृत स्थिर छ।उस्तै, यसले विशेष रूपमा सम्बन्धित एन्टिजेनमा बाँध्न सक्छ, तर यसको सी क्षेत्रको संरचना उस्तै छ, अर्थात्, यसको एउटै एन्टिजेनिसिटी छ।घोडा एन्टी-ह्युमन IgG सेकेन्डरी एन्टिबडी (वा एन्टी-एन्टिबडी) सँग जोड्न सकिन्छ भने विभिन्न एक्सोटोक्सिनहरू विरुद्ध एन्टिबडी (IgG) को संयोजन हुन्छ।यो माध्यमिक एन्टिबडीहरू तयार गर्न र फ्लोरेसिन, आइसोटोप, इन्जाइमहरू र अन्य लेबल गरिएका एन्टिबडीहरू लागू गर्नको लागि महत्त्वपूर्ण आधार हो।
 
 
सम्बन्धित उत्पादनहरु:
सेल प्रत्यक्ष RT-qPCR किट