प्रयोगशाला परीक्षण नमूना सङ्कलनबाट सुरु हुन्छ, र नमूना सङ्कलनलाई बेवास्ता गर्न सजिलो हुन्छ।नमूना सङ्कलनको लागि सबैभन्दा महत्त्वपूर्ण कुरा सही नमूना प्रकार चयन गर्न, उपयुक्त नमूना उपकरणहरू प्रयोग गर्न, र उचित ढुवानी र प्रशोधन गर्न हो।

I. नमूना प्रकार

सामान्य नमूना प्रकारहरू निम्नानुसार छन्:

नमूना विधिले कृषि व्यापार (बजार) बजारमा नयाँ कोरोनाभाइरसको वातावरणीय अनुगमनका लागि प्राविधिक विशिष्टताहरूलाई सन्दर्भ गर्न सक्छ।

1. घाँटी स्वाब, हात, लुगा र चिकित्सकहरु को अन्य वस्तुहरु बाट स्वाब नमूनाहरु: यो भाइरस नमूना ट्यूब मा भाइरस संरक्षण समाधान प्रयोग गर्न र नमूना कपास स्वाब पूर्ण घुसपैठ गर्न आवश्यक छ।जमिनको सतह) बारम्बार लागू गरिन्छ र 3 पटक भन्दा बढी कुल्ला गरिन्छ।एकै समयमा, नमूना वस्तुको सतहमा बहु-बिन्दु वितरित नमूना प्रदर्शन गर्न आवश्यक छ।

2. खाद्य सतह स्वाब नमूनाहरू: खाद्य नमूनाहरू सीधै सङ्कलन गर्न सकिँदैन।सङ्कलन गरिने खानालाई सावधानीपूर्वक छुट्याउनुपर्छ र स्वाब नमूनाहरू सङ्कलन गर्नु अघि सफा नमूना झोलामा भण्डारण गर्नुपर्छ।नमूना कपास स्वाबलाई पूरै भिजाएर, सङ्कलन गरिने खानाको नमूनाको सतहमा बारम्बार दाग र कुल्ला गर्न भाइरस नमूना नलीमा भाइरस संरक्षण समाधान प्रयोग गर्न आवश्यक छ।एकै समयमा, यो नमूना सतह मा बहु-बिन्दु वितरित नमूना प्रदर्शन गर्न आवश्यक छ।

3. ढलको नमूनाहरू: बजारमा ड्रेनेज प्रणालीको वितरण अनुसार, आन्तरिक पाइप नेटवर्क सङ्कलन, पानीको प्रवाहको डाउनस्ट्रीम दिशा, वा नगरपालिका पाइप नेटवर्कसँग जडानमा केन्द्रित 2-3 ढल नमूना स्थानहरू चयन गर्नुहोस्।स्वाबको नमूना सङ्कलन गर्न, यसलाई ढलको फोहोर सोस्न बनाउनको लागि नमूना कपास स्वाबको साथ ढलमा डुबाउनुहोस् र नमूना ट्यूबमा 3 पटक भन्दा बढी कुल्ला गर्नुहोस्।ढलको नमूनाहरू सङ्कलन गर्न, 30-500 एमएल ढलको पानीको नमूनाहरू सङ्कलन गर्न पोलिथीन प्लास्टिकको बोतलहरू प्रयोग गर्नुहोस्;500 एमएल भन्दा बढी भोल्युम भएको ढल संकलनको लागि, पोलिथीन प्लास्टिक बाल्टिन वा साइटमा पानी नमूना विशेष संवर्धन उपकरण प्रयोग गर्न सकिन्छ।एकै समयमा, ढल नमूना स्थानको लागि बहु-बिन्दु वितरित नमूना सञ्चालन गर्न आवश्यक छ।

4. पशु नमूनाहरू: जीवित जनावरहरूको लागि, नमूना स्वाबहरू शरीरको सतह स्वाबहरू, oropharyngeal स्वाब र गुदा स्वाबहरू सङ्कलन गर्न प्रयोग गर्न सकिन्छ, र मल वा स्राव नमूनाहरू पनि सङ्कलन गर्न सकिन्छ र रेकर्ड पानामा रेकर्ड गर्न सकिन्छ।छाला, आदि गुजरेका जनावर नमूनाहरूको लागि, तिनीहरूको शरीरको सतह र शरीर गुफा स्वाब नमूनाहरू सङ्कलन गर्न कपास स्वाब प्रयोग गर्नुहोस्।नमूना कपास स्वाबमा पूर्ण रूपमा घुसाउनको लागि भाइरस नमूना ट्यूबमा भाइरस संरक्षण समाधान प्रयोग गर्न आवश्यक छ, र त्यसपछि सङ्कलन गरिने खाद्य नमूनाको सतहको प्रयोग दोहोर्याउनुहोस्।शाबुले ३ पटकभन्दा बढी ।एकै समयमा, यो नमूना सतह मा बहु-बिन्दु वितरित नमूना प्रदर्शन गर्न आवश्यक छ।

5. अन्य उपकरणहरू: पिंजरा वा माछा ट्याङ्की जस्ता जनावरहरू ढुवानी र प्रजननका लागि कन्टेनरहरू।पहिले, कन्टेनरमा भण्डार गरिएको र प्रजनन गरिएका विशेष प्रकारका जनावरहरू अवलोकन गर्नुहोस् वा बुझ्नुहोस्, र कन्टेनरको भित्री पर्खालमा स्वाब नमूनाहरू वा सामग्रीहरूको तरल नमूनाहरू सङ्कलन गर्नुहोस्।

6. मानिसहरू भेला भएका क्षेत्रहरूमा, कम हावामा हावा नपुगेको स्थानीय व्यापारिक क्षेत्रहरू, कार्यालयहरू, र विश्राम कोठाहरूमा एरोसोल नमूनाहरू सङ्कलन गर्नुहोस्।

II. नमूना उपकरण
1. रगत संकलन ट्यूब
यदि तपाईंले पछि न्यूक्लिक एसिड परीक्षण र एन्टीकोगुलेन्ट नमूनाहरू गर्न आवश्यक छ भने, रगत सङ्कलन गर्न EDTA एन्टिकोगुलेन्ट भएको भ्याकुम रक्त नली प्रयोग गर्न सिफारिस गरिन्छ;सीरम नमूनाहरूको लागि, एन्टिकोगुलेन्ट बिना भ्याकुम रक्त नली प्रयोग गर्न सिफारिस गरिन्छ।

2. नमूना स्वाब

क्याल्सियम एल्जिनेट स्वाब वा काठको खम्बाको साथ स्वाबको सट्टा पोलीप्रोपाइलिन स्वाबहरू प्रयोग गर्न सिफारिस गरिन्छ, किनभने तिनीहरूमा केही भाइरसहरूलाई निष्क्रिय पार्ने र PCR परीक्षणलाई रोक्न सक्ने पदार्थहरू हुन सक्छन्।कपासको टाउको भएका स्वाबहरू प्रयोग गर्न सकिँदैन, किनभने कपासको फाइबरमा प्रोटिनको बलियो शोषण हुन्छ र त्यसपछिको संरक्षण समाधानमा सजिलै मेटाइँदैन।

"10-in-1 मिश्रित सङ्कलन र नयाँ कोरोनाभाइरस न्यूक्लिक एसिड पत्ता लगाउनका लागि प्राविधिक विशिष्टताहरू" मा, यो स्पष्ट रूपमा निर्दिष्ट गरिएको छ कि "नमूना स्वाब पोलिएस्टर, नायलन र अन्य गैर-कपास र गैर-क्याल्सियम एल्जिनेट सामग्रीबाट बनाइएको हुनुपर्छ, र ह्यान्डल गैर-काठको सामग्रीको हुनुपर्छ।ब्रेकिङ पोइन्ट स्वाब टाउकोको माथिबाट करिब 3 सेन्टीमिटर टाढा छ, जुन तोड्न सजिलो छ।"

संयुक्त राज्य अमेरिकाको सीडीसीले पनि उल्लेख गरेको छ "प्लास्टिक वा तार शाफ्टको साथ मात्र सिंथेटिक फाइबर स्वाबहरू प्रयोग गर्नुहोस्।काठको शाफ्टको साथ क्याल्सियम अल्जिनेट स्वाब वा स्वाबहरू प्रयोग नगर्नुहोस्,किनकि तिनीहरूले केही भाइरसहरूलाई निष्क्रिय पार्ने र PCR परीक्षणलाई रोक्ने पदार्थहरू समावेश गर्न सक्छन्।

हाल व्यापक रूपमा प्रयोग गरिन्छ एक डिस्पोजेबल बाँझ नायलन फ्लकिङ स्वाब एक प्लास्टिक रड संग संयुक्त।फ्लकिङ स्वाबमा राम्रो पानी अवशोषण र रिलिज दर छ।विभिन्न नमूना साइटहरू अनुसार, स्वाब टाउको पनि विभिन्न आकार र फाइबर छ।मोटाई।"

3. नमूना यातायात संरक्षण समाधान

भाइरस निष्क्रियता संरक्षण समाधान: ग्वानिडाइन नुन एकाग्रताको एक उपयुक्त मात्रा र विभिन्न प्रकारका भाइरस लाइसिस कम्पोनेन्टहरूले न्यूक्लिक एसिड रिलिज गर्न, RNase र DNase लाई निष्क्रिय पार्न, र न्यूक्लिक एसिडको अखण्डता सुनिश्चित गर्न सीधा भाइरसलाई लाइज गर्न सक्छ, जुन पछिको qPCR पत्ता लगाउन प्रयोग गर्न सकिन्छ।यो भाइरस खेती र अलगाव को लागी प्रयोग गर्न सकिदैन।

भाइरसको ढुवानी र संरक्षण समाधान: यसमा भाइरसबाट बच्नको लागि आवश्यक नुन, एमिनो एसिड, भिटामिन, ग्लुकोज र प्रोटिन हुन्छ, जसले भाइरसको गतिविधिलाई कायम राख्न सक्छ।यसलाई भविष्यमा न्यूक्लिक एसिड निकासी र भाइरस पत्ता लगाउन प्रयोग गर्न सकिन्छ, र यो भाइरसको खेती र विभाजनको लागि पनि प्रयोग गर्न सकिन्छ।

4. नमूना संरक्षण ट्यूब र नमूना झोला

नमूना भण्डारण ट्यूब एक स्क्रू टोपीको साथ एक बाँझ प्लास्टिक ट्यूब हुनुपर्छ जसले न्यूक्लिक एसिडलाई सोख्दैन।नमूनाको चुहावट र प्रदूषण रोक्नको लागि प्रत्येक नमूना ट्यूबलाई नमूना झोलाले छोपिएको हुनुपर्छ।

III।नमूनामा हस्तक्षेप गर्ने पदार्थहरू

PCR प्रयोगहरूमा हस्तक्षेप गर्ने पदार्थहरू

1. अंतर्जात हस्तक्षेपकारी

शरीरको नमूनामा उपस्थित पदार्थहरूले अन्य पदार्थहरूको पहिचानमा हस्तक्षेप गर्न सक्छ।

रगत:heme (>1mg/ml), hemin (>0.1ng/μl), ट्राइग्लिसराइड्स, IgG, आदि;

पिसाब:यूरिया (20 मिमी);

मल:बिरुवा polysaccharides, cholate;

टिस्यु:प्रोटीज, कोलेजन;

दूध: प्रोटीज, क्याल्सियम आयन;

ड्रग्स: एन्टिबायोटिक, एन्टिभाइरल ड्रग्स, हर्मोन आदि।

अन्य।

2. exogenous interferent

यो पदार्थहरूबाट आउँछ जुन भिट्रोमा अन्य पदार्थहरूको पहिचानमा हस्तक्षेप गर्न सक्छ।नमूना सङ्कलन र प्रशोधन गर्दा सम्पर्क गर्न सकिने नमूना additives र पदार्थहरू:

परीक्षण आपूर्ति: सीरम विभाजन जेल, नमूना सङ्कलन कन्टेनर र रबर स्टपर, क्याथेटर, क्याथेटर फ्लसिङ फ्लुइड, ग्लोभ पाउडर, आदि।

Anticoagulant: हेपरिन (>0.1 U/mL), EDTA (>0.5 mM), आदि;

अर्गानिक सॉल्भेन्ट्स: isopropanol (>0.1 IU/ml), betaine, dimethyl sulfoxide, formamide, glycerin, PEG, आदि;

कीटाणुनाशकहरू: अल्कोहल (इथानोल>१%), एल्डिहाइड, फिनोल (फिनोल>०.२%), पेरोक्साइड, बलियो एसिड (HCL), बलियो क्षार (NaOH), आदि;

डिटर्जेन्ट:SDS (>0.005%);

माटो: ह्युमस

डाइस्टफ: इन्डिगो

अन्य।

वास्तविक बाहिरी नमूना अवस्थाहरूमा, जस्तै वातावरणीय नमूनाहरू सङ्कलन गर्दा, नमूनाहरूले विभिन्न प्रकारका हस्तक्षेपकारी पदार्थहरू समावेश गर्न सक्छन्, र प्रत्येक स्थानमा हस्तक्षेप गर्ने पदार्थहरूको संरचना फरक हुन्छ, जसका लागि स्थानीय अवस्थाहरू अनुसार PCR हस्तक्षेप प्रयोगहरू गर्न आवश्यक हुन्छ।

IV।नमूना भण्डारण र यातायात सर्तहरू

ताजा सङ्कलन गरिएका क्लिनिकल नमूनाहरू सङ्कलन गरेको २ देखि ४ घण्टाभित्र २ डिग्री सेल्सियसदेखि ८ डिग्री सेल्सियसमा प्रयोगशालामा पठाउनुपर्छ।24 घण्टा भित्र 4℃ मा भण्डार गर्नुहोस्।भाइरस अलगाव र न्यूक्लिक एसिड पत्ता लगाउन प्रयोग गरिने नमूनाहरू सकेसम्म चाँडो परीक्षण गर्नुपर्छ।24 घण्टा भित्र परीक्षण गर्न सकिने नमूनाहरू 4 डिग्री सेल्सियसमा भण्डारण गर्न सकिन्छ;24 घण्टा भित्र पत्ता लगाउन नसकिने नमूनाहरू -70 डिग्री सेल्सियस वा तल भण्डारण गर्नुपर्छ (यदि होइन भने - 70 डिग्री सेल्सियसमा फ्रिजमा -20 डिग्री सेल्सियसमा भण्डार गर्नुहोस्)।

सारांश:नमूनाहरूको मानक सङ्कलन, ढुवानी र भण्डारण पछिको परीक्षणको लागि आवश्यक छ।धेरै प्रयोगशाला परीक्षणहरूको गलत नकारात्मक नमूनाहरूको संकलन, ढुवानी र भण्डारणको कारणले गर्दा भाइरल न्यूक्लिक एसिडको ह्रास हुन्छ।यद्यपि, धेरै प्रयोगशालाहरूले अझै पनि नमूनाको महत्त्वलाई बेवास्ता गर्छन्।मलाई आशा छ कि यो लेखले नमूनाकरणमा सबैको ध्यान जगाउन सक्छ र थप वैज्ञानिक र व्यावहारिक नमूना बनाउन सक्छ!

सम्बन्धित उत्पादन:

SARS-CoV-2 भेरियन्ट न्यूक्लिक एसिड पत्ता लगाउने किट (I) (मल्टीप्लेक्स पीसीआर फ्लोरोसेन्ट प्रोब मेथड)-ब्राजिल, दक्षिण अफ्रिका र युकेबाट उत्परिवर्ती पत्ता लगाउनका लागि