परिचय:

आरएनए अणुहरूले अन्य जैविक अणुहरू, जस्तै प्रोटीन, डीएनए र आरएनएसँग व्यापक रूपमा अन्तरक्रिया गर्न सक्छन् र यसरी कोशिकाहरू र जीवहरूमा म्याक्रोमोलेकुलर कम्प्लेक्सको रूपमा अवस्थित हुन्छन्।ती मध्ये, आरएनए-प्रोटिन कम्प्लेक्सहरू आरएनएको अस्तित्व र कार्य हुन्।RNA पुल-डाउन RNA अणुहरू, विशेष गरी lncRNA अणुहरूको अन्तर्क्रिया गर्ने प्रोटीनहरूको स्क्रीनिंग र पहिचानको लागि एक क्लासिक विधि हो, र यसलाई अधिकांश शोधकर्ताहरू र अन्तर्राष्ट्रिय आधिकारिक शैक्षिक पत्रिकाहरूले मान्यता दिन्छ।आज FORREGENE ले तपाइँसँग आरएनए पुल-डाउनको प्रायोगिक सिद्धान्त र प्राविधिक प्रक्रिया साझा गर्नेछ, सायद तपाइँ यसलाई प्रयोग गर्न सक्नुहुन्छ।

1. आरएनए पुल डाउन प्रविधिको प्रयोगात्मक सिद्धान्त:

इन भिट्रो ट्रान्सक्रिप्शन र बायोटिन-लेबल गरिएको लक्ष्य lncRNA वा lncRNA टुक्राहरूको संश्लेषण (सकारात्मक र नकारात्मक नियन्त्रणको रूपमा प्रयोग गरिएको आरएनए टुक्राहरू सहित), र सेल अर्कहरूसँग इन्क्युबेट;आरएनए-प्रोटिन वा आरएनए-आरएनए कम्प्लेक्सहरू सङ्कलन गर्न एभिडिन-लंगरयुक्त चुम्बकीय मोतीहरू प्रयोग गर्नुहोस्, राम्ररी धोएपछि, कम्प्लेक्स एल्युट हुन्छ।यदि lncRNA सँग अन्तर्क्रिया गर्ने प्रोटीन लक्ष्य अणु पत्ता लगाउँदै, RNA-पुल डाउन उत्पादनमा प्रोटीन इलेक्ट्रोफोरेसिस प्रदर्शन गर्नुहोस्, चाँदीको दागद्वारा लक्षित प्रोटीन पत्ता लगाउनुहोस्, र मास स्पेक्ट्रोमेट्रीको लागि जेल काट्नुहोस्;पुल-डाउन उत्पादनमा प्रत्यक्ष रूपमा पश्चिमी ब्लट प्रमाणिकरण पनि गर्दछ;यदि lncRNA सँग अन्तरक्रिया गर्ने RNA लक्ष्य अणुहरूको लागि पत्ता लगाइयो भने, RNA-पुल डाउन उत्पादनहरू RNA निकासीको अधीनमा हुन्छन् र विशिष्ट qRT-PCR पत्ता लगाइन्छ।

2. आरएनए पुल डाउन टेक्नोलोजी प्रयोग प्रक्रिया:

3. आरएनए को लागि प्राविधिक सेवा FOREGEN को पुल डाउन:

सेल संस्कृति

सेल कुल/आणविक/प्लाज्मा प्रोटीन निकासी को तयारी

आरएनए पुल डाउन प्रयोग

SDS-PAGE इलेक्ट्रोफोरेसिस, चाँदीको दाग

मास स्पेक्ट्रोमेट्री र WB प्रयोगहरू

प्रयोगात्मक रिपोर्ट

4. प्रयोगात्मक मामला

निम्न चित्रले FJ Bio-Bio को RNA पुल डाउन र SDS-PAGE इलेक्ट्रोफोरेसिस पत्ता लगाउने नतिजाहरू देखाउँछ, जसमा रातो तीरले फरक ब्यान्डलाई चिन्ह लगाउँछ:

सिचुआन युनिभर्सिटीका प्रोफेसर सांग सुको अनुसन्धान समूहले lncRNA अनुसन्धानको क्षेत्रमा 15 वर्षको दीर्घकालीन सञ्चय गरेको छ।Foregene Bio र प्रोफेसर Song Xu को अनुसन्धान समूहले lncRNA को RNA पुल डाउन टेक्नोलोजी सुरु गर्न सहयोग गर्यो, जसले तपाइँको प्रयोगको लागि सन्तोषजनक नतिजा दिनेछ।