निर्माण SOP प्रणाली

प्रयोगकर्मीहरूको व्यवहारलाई मानकीकरण गर्न PCR प्रयोग SOP स्थापना गर्नुहोस्।

प्रयोगकर्ताहरूले कडाईका साथ अपरेटिङ प्रक्रियाहरूको पालना गर्छन्, र PCR प्रदूषणलाई कम गर्छन् जुन मानव कारकहरूबाट हुन सक्छ वा सञ्चालनमा प्रदूषणको घटनालाई रोक्न सक्छ।थप रूपमा, प्रयोगकर्तासँग सम्बन्धित व्यावसायिक ज्ञान र सीपहरू हुनुपर्दछ, जसमा सम्बन्धित उपकरणहरू सञ्चालन गर्ने प्रवीणता, सम्पूर्ण कार्य प्रक्रियालाई स्पष्ट पार्ने, प्रदूषणको उपचार विधिहरू र प्रयोगशाला गुणस्तर नियन्त्रण विधिहरूमा महारत हासिल गर्ने, र परीक्षण परिणामहरूको सही व्याख्या गर्न सक्षम हुनु।

मानक पीसीआर प्रयोगशाला निर्माण

पीसीआर प्रयोगशालालाई सैद्धान्तिक रूपमा चार क्षेत्रमा विभाजन गरिएको छ, अर्थात् अभिकर्मक तयारी क्षेत्र, नमूना प्रशोधन क्षेत्र, प्रवर्धन क्षेत्र र प्रवर्धन उत्पादन विश्लेषण क्षेत्र।पहिलो दुई क्षेत्रहरू पूर्व-प्रवर्द्धन क्षेत्रहरू हुन्, र अन्तिम दुई क्षेत्रहरू पोस्ट-प्रवर्द्धन क्षेत्रहरू हुन्।प्रि-प्रवर्द्धन क्षेत्र र पोस्ट-प्रवर्द्धन क्षेत्र कडा रूपमा अलग हुनुपर्छ।प्रायोगिक सामग्री, अभिकर्मकहरू, रेकर्डिङ कागज, कलम, सफाई सामग्री, आदि केवल प्रि-प्रवर्द्धन क्षेत्रबाट पोस्ट-प्रवर्द्धन क्षेत्रमा प्रवाह गर्न सकिन्छ, अर्थात्, अभिकर्मक तयारी क्षेत्र, नमूना प्रशोधन क्षेत्र, प्रवर्धन क्षेत्र, र प्रवर्धन उत्पादन विश्लेषण क्षेत्र, र उल्टो दिशामा प्रवाह हुनु हुँदैन।प्रयोगशालामा वायुप्रवाह पनि पूर्व-प्रवर्द्धन क्षेत्रबाट पोस्ट-प्रवर्द्धन क्षेत्रमा प्रवाह हुनुपर्छ, उल्टो दिशामा होइन।

प्रयोगात्मक चरणहरू घटाउनुहोस्

यदि प्रयोगशालाले पीसीआर पत्ता लगाउने र पहिचान गर्ने मात्र गर्छ भने, यो पारंपरिक पीसीआरको सट्टा फ्लोरोसेन्ट मात्रात्मक पीसीआर प्रयोग गर्न सिफारिस गरिन्छ।

फ्लोरोसेन्स मात्रात्मक PCR पत्ता लगाउने नतिजाहरू फ्लोरोसेन्ट संकेतहरूद्वारा सङ्कलन र विश्लेषण गर्न सकिन्छ, त्यसैले प्रतिक्रिया पछि इलेक्ट्रोफोरेसिसको लागि ढक्कन खोल्न आवश्यक पर्दैन, जसले एरोसोलहरू बनाउन प्रतिक्रिया उत्पादनहरूको चुहावटले गर्दा हुने PCR उत्पादनहरूको प्रदूषणबाट बच्न सक्छ।यदि तपाईंले जेल इलेक्ट्रोफोरेसिसको लोडिङ चरणको समयमा क्याप ओपनिङको संख्या बढाउनुभयो भने, एरोसोल प्रदूषण हुन सक्छ।मात्रात्मक पीसीआरको प्रयोगलाई बढावा दिन र गुणात्मक पीसीआरलाई क्रमशः प्रतिस्थापन गर्न सिफारिस गरिन्छ।

UNG विरोधी प्रदूषण प्रणाली अपनाउने

UNG विरोधी PCR उत्पादन प्रदूषण प्रणाली PCR प्रतिक्रिया को लागी प्रयोग गरिन्छ।

प्रणालीले dTTP को सट्टा dUTP प्रयोग गर्दछ।PCR प्रतिक्रिया पछि, सबै PCR उत्पादनहरू (DNA टुक्राहरू) dUTP सँग समावेश हुन्छन्;PCR प्रतिक्रियाको अर्को चरणमा, प्रणालीमा थपिएको UNG इन्जाइम PCR अघि 5 मिनेटको लागि 37°C मा इन्क्युबेटेड हुन्छ, जुन विशिष्ट हुन सक्छ DUTP युक्त सबै DNA टुक्राहरूलाई डिग्रेड गर्नुहोस्, र त्यसपछि PCR प्रतिक्रिया गर्नुहोस्।यसले PCR उत्पादनहरूबाट हुने एरोसोल प्रदूषणलाई पूर्ण रूपमा हटाउन सक्छ।प्रभाव तलको चित्रमा देखाइएको छ:

नोट: प्रत्यक्ष PCR शृङ्खलाको लागि, तपाईंले FJ बायोटेकको एन्टी-PCR उत्पादन प्रदूषण प्रणालीको श्रृंखला उत्पादनहरू छनौट गर्न सक्नुहुन्छ।

सुझाव दिनुहोस्

ठूला-ठूला जीनोटाइपिङ परीक्षण सञ्चालन गर्ने प्रयोगशालाहरूका लागि, उचित प्रयोगशालाहरूको निर्माणको अतिरिक्त परीक्षण अभिकर्मकहरूको लागि UNG एन्टि-पीसीआर उत्पादन प्रदूषण प्रणाली प्रयोग गर्न कडा रूपमा सिफारिस गरिन्छ।

रिमाइन्डर: यस प्रणालीको प्रयोगले पहिले नै भएको PCR उत्पादन प्रदूषण हटाउन सक्दैन।तसर्थ, UNG प्रणाली सान्दर्भिक परीक्षणको सुरुमा प्रयोग गर्नुपर्छ, र UNG प्रणाली सधैं PCR एम्प्लीफिकेशनको लागि प्रयोग गरिनुपर्छ, ताकि PCR उत्पादनहरूको प्रदूषण रोक्नको लागि।झूटा सकारात्मक।

फोर्ज बायोटेकको प्रत्यक्ष PCR-UNG प्रणाली प्रयोग गर्न सिफारिस गरिन्छ जब ठूलो मात्रामा परीक्षणहरू सञ्चालन गरिन्छ, जस्तै: बिरुवाको पात प्रत्यक्ष PCR किट-UNG；

बिरुवाको बीउ प्रत्यक्ष पीसीआर किट-यूएनजी;

पशु टिस्यु डायरेक्ट पीसीआर किट-यूएनजी;

माउस टेल डाइरेक्ट पीसीआर किट-यूएनजी;

जेब्रा फिश डाइरेक्ट पीसीआर किट-यूएनजी।

फोरेजीनका किटहरूको यो शृङ्खलाले छिटो र ठूलो मात्रामा पीसीआर पत्ता लगाउन मात्र होइन, प्रभावकारी रूपमा पीसीआर उत्पादनको प्रदूषणलाई रोक्न र नियन्त्रण गर्न पनि सक्छ।