PCR को जन्म
PCR (Polymerase Chain Reaction)
पोलिमरेज चेन रिएक्शनको आविष्कार भएको ३० वर्षभन्दा बढी भइसक्यो।३० वर्षभन्दा बढी समयदेखि, विश्वभरका धेरै विद्वानहरूले पूरक र सुधार गरिरहँदा, PCR प्रविधि सम्पूर्ण जीवन विज्ञान क्षेत्रमा सबैभन्दा व्यापक र बारम्बार प्रयोग हुने र सबैभन्दा महत्त्वपूर्ण आधारभूत अनुसन्धान विधि भएको छ।
परम्परागत पीसीआर प्रविधिको व्यापक प्रयोगको आधारमा विकसित टचडाउन पीसीआर, रियल-टाइम पीसीआर, मल्टि पीसीआर, इत्यादि, साथै भर्खरै उभरिएको डिजिटल पीसीआर (डिजिटल पीसीआर) ले बहुसंख्यक वैज्ञानिक अनुसन्धानकर्ताहरूको अनुसन्धान विधिलाई धेरै समृद्ध बनाएको छ र आधुनिक जीवन विज्ञानको विकास प्रक्रियालाई तीव्रता दिएको छ।
परम्परागत पीसीआर प्रविधिको दोष
जटिल न्यूक्लिक एसिड विभाजन रनिकासी:
★ परम्परागत पीसीआर प्रविधि: आवश्यक
★ PCR व्युत्पन्न प्रविधि: आवश्यक
★ DNA र RNA नमूनाहरू: ठूला भिन्नताहरू, कठिन सञ्चालन आवश्यकताहरू
★ शारीरिक खतराहरू: विषाक्त अभिकर्मकहरूले शरीरलाई हानि पुर्याउँछन्
परम्परागत पीसीआर प्रविधि र व्युत्पन्न टेक्नोलोजीमा पूर्वशर्त हुन्छ - न्यूक्लिक एसिड विभाजन र शुद्धिकरण
PCR प्रविधिको आवश्यकताहरू पूरा गर्ने न्यूक्लिक एसिड नमूनाहरू प्राप्त गर्न कुनै पनि जैविक नमूनाले जटिल र थकाइलाग्दो नमूना प्रशोधनको श्रृंखला मार्फत जानुपर्छ।
DNA र RNA को पृथकीकरण र निकासी सधैं आधारभूत कार्य भएको छ जुन प्रासंगिक वैज्ञानिक अनुसन्धानकर्ताहरूले हरेक दिन दोहोर्याउनु पर्छ।
नमूनाहरू बीचको ठूलो भिन्नताको कारण, DNA र RNA को विभाजन र निकासी प्रक्रियाहरू पनि धेरै फरक छन्।यो काम अपरेटरहरूको लागि उच्च स्तरको प्राविधिक दक्षता चाहिन्छ।परम्परागत पृथकीकरण र निकासी प्रविधिहरूलाई केही अत्यधिक विषाक्त रासायनिक अभिकर्मकहरूसँग दीर्घकालीन सम्पर्क चाहिन्छ।यसले अपरेटरको शरीरमा अपरिवर्तनीय क्षति निम्त्याउनेछ, र प्रयोगको क्रममा प्रत्यक्ष क्षति पनि निम्त्याउँछ।
एकै समयमा, अध्ययन गर्न नमूनाहरूको ठूलो संख्या भएकाहरूका लागि, न्यूक्लिक एसिडको विभाजन र निकासी श्रम-गहन कार्य हो।
बजारमा न्यूक्लिक एसिड अलगाव र निकासी किटहरू अब परिपक्व छन् र त्यहाँ धेरै ब्रान्डहरू छन्, तर तिनीहरू लगभग समान छन्।चाहे यो सिलिका जेल मेम्ब्रेन स्तम्भ केन्द्रापसारक किट होस् वा चुम्बकीय मनका विधि किट, यसले धेरै समय लिन्छ र महँगो छ।किटको लागतको अतिरिक्त, प्रयोगशाला उपकरणहरूको लागि विशेष आवश्यकताहरू पनि छन्।चुम्बकीय मोती विधिमा प्रयोग गरिएको स्वचालित कार्यस्थान एक धेरै विशिष्ट ठूला स्तरको उच्च मूल्यको उपकरण हो, जुन प्रयोगशालाको लागि ठूलो खर्च हो।
संक्षिप्तमा
पीसीआर प्रयोग गर्नु अघि, नमूनाहरूको पूर्व-उपचार अनुसन्धानकर्ताहरूको लागि अपरिहार्य र सधैं टाउको दुखाइ हो।यो समस्याको समाधान कसरी गर्ने र न्यूक्लिक एसिडलाई अलग र निकासी नगरी पीसीआर प्रयोग गर्न सकिन्छ कि हुँदैन भन्ने कुरा जहिले पनि बहुसंख्यक वैज्ञानिक अनुसन्धानकर्ता र क्लिनिकल प्रयोगशालाका कर्मचारीहरूको विचारमा रहेको छ।
Foregene को समाधान
डायरेक्ट पीसीआर प्रविधि र सम्बन्धित किटहरूमा वर्षौंको मेहनती अनुसन्धान पछि, फोर्जेनले सफलतापूर्वक धेरै बाधाहरू पार गर्यो र कडा प्रतिरोध र अनुकूलन क्षमताका साथ धेरै प्रकारका विभिन्न नमूनाहरूको लागि प्रत्यक्ष पीसीआर सफलतापूर्वक हासिल गर्यो, अनुसन्धानकर्ताहरूलाई बोझिलो र खतरनाक विभाजन र न्यूक्लिक एसिडको निकासीबाट छुटकारा पाउन अनुमति दिँदै।यसले सबैको श्रम तीव्रतालाई धेरै कम गर्नेछ, प्रयोग प्रक्रियालाई गति दिन्छ, र वैज्ञानिक अनुसन्धान र परीक्षण लागतहरू बचत गर्नेछ।
Forgene को समझ र DirectPCR को ज्ञान
पहिलो, DirectPCR टेक्नोलोजी विभिन्न जैविक नमूना तन्तुहरूको लागि प्रत्यक्ष PCR प्रविधि हो।यस प्राविधिक अवस्था अन्तर्गत, न्यूक्लिक एसिडहरू छुट्याउन र निकाल्न आवश्यक पर्दैन, र टिस्यु नमूना सीधै वस्तुको रूपमा प्रयोग गरिन्छ, र PCR प्रतिक्रियाको लागि लक्षित जीन प्राइमरहरू थपिन्छन्।
दोस्रो, DirectPCR प्रविधि परम्परागत DNA टेम्प्लेट एम्प्लीफिकेशन प्रविधि मात्र होइन, यसमा RNA टेम्प्लेट रिभर्स ट्रान्सक्रिप्शन PCR पनि समावेश छ।
तेस्रो, DirectPCR टेक्नोलोजीले टिस्यु नमूनाहरूमा नियमित गुणात्मक PCR प्रतिक्रियाहरू मात्र गर्दैन, तर वास्तविक-समय qPCR प्रतिक्रियाहरू पनि समावेश गर्दछ, जसमा प्रतिक्रिया प्रणालीलाई पृष्ठभूमि प्रतिदीप्ति हस्तक्षेपको प्रतिरोध गर्न र अन्तर्जात फ्लोरोसेन्स क्वेन्चर्सहरूको विरोध गर्न बलियो क्षमताको आवश्यकता पर्दछ।
चौथो, DirectPCR टेक्नोलोजीद्वारा लक्षित टिस्यु नमूनाहरूलाई केवल न्यूक्लिक एसिड टेम्प्लेटहरू रिलीज गर्न आवश्यक छ र PCR प्रतिक्रियामा हस्तक्षेप गर्ने प्रोटिन, पोलिसाकराइड, नुन आयनहरू, आदि हटाउँदैन।यसका लागि प्रतिक्रिया प्रणालीमा न्यूक्लिक एसिड पोलिमरेज र PCR मिक्स उत्कृष्ट विरोधी-रिभर्सिबिलिटी र अनुकूलनता हुन आवश्यक छ, र जटिल परिस्थितिहरूमा इन्जाइम गतिविधि र प्रतिकृति सटीकता सुनिश्चित गर्न सक्छ।
पाँचौं, DirectPCR टेक्नोलोजी द्वारा लक्षित टिश्यु नमूनाहरू कुनै पनि न्यूक्लिक एसिड संवर्धन उपचारको अधीनमा छैनन्, र टेम्प्लेट मात्रा धेरै सानो छ, जसलाई प्रतिक्रिया प्रणालीको अत्यधिक उच्च संवेदनशीलता र प्रवर्धन दक्षता चाहिन्छ।
निष्कर्ष
DirectPCR टेक्नोलोजी PCR प्रविधिको जन्म पछि विगत 30 वर्षमा सबैभन्दा महत्त्वपूर्ण प्राविधिक विकास र आविष्कारहरू मध्ये एक हो।Forgene यस प्रविधिको अग्रगामी र आविष्कारक हुन जारी छ र जारी रहनेछ।
DirectPCR प्रविधिको आवेदन सम्भावना धेरै फराकिलो छ।यस प्रविधिको निरन्तर सुधार र प्रवर्द्धनले वैज्ञानिक अनुसन्धान र निरीक्षण कार्यमा पक्कै पनि विनाशकारी परिवर्तन ल्याउनेछ।यो पीसीआर प्रविधिको क्रान्ति हो।
पोस्ट समय: फेब्रुअरी-21-2017
